色譜柱長期不用,影響壽命么?
(圖片來源:baotu)
色譜柱已經放了2年,還能再用么?
長期不用是否會影響柱子壽命?
(圖源:soogif)
相信這些問題困擾了很多檢測人員。
其實,只要保存方法得當,
這些情況都是沒問題的。
打算長期不用的色譜柱,“使用結束后”到“下次使用前”共有三個步驟:
第一步:色譜柱使用后的沖洗與封存。
第二步:色譜柱長期保存過程中的定期沖洗(建議間隔2個月沖洗1次)。
第三步:色譜柱使用前的充分活化。
三個步驟的必要性:
● 最后一次使用后的沖洗不夠或保存不當,可能會導致色譜柱內樣品殘留、長菌、緩沖鹽析出、酸堿體系引起柱效下降?……
● 定期沖洗可避免色譜柱內的保存溶劑因長期儲存而發生變質、或溶劑揮發導致填料干涸,定期沖洗可幫助填料始終保持在浸潤狀態。
● 充分活化的重要性:色譜柱長期不用,其中的保存試劑可能會揮發;有時新購買的色譜柱在運輸過程中,色譜柱中保存的高比例有機相也可能會揮發,導致填料干涸。但只要使用前進行充分活化,即可正常使用色譜柱。
未定期沖洗導致保存溶劑變質
不同色譜柱的保存溶劑、定期沖洗
和活化方法
01 反相色譜柱
步驟
沖洗封存
定期沖洗
活化程序
流動相
80%有機相
80%有機相
80%有機相
流速
N/A
1/4實驗流速
1/4實驗流速
時間
N/A
1h4h柱溫
陰涼干燥保存
30℃
30℃
備柱
*Ultimate??Polar-RP置于2-8℃冷藏保存;
沖洗和活化需先將色譜柱恢復到室溫;
*80%有機相(建議甲醇或乙腈)
02?Xtimate? SEC系列分子排阻柱
步驟
沖洗封存
定期沖洗
活化程序
流動相
90%乙腈
90%乙腈
先用乙腈、再用純水
流速
N/A
1/4實驗流速
1/4實驗流速
時間
N/A
1h
各5h
柱溫
陰涼干燥保存
30℃
30℃
03?Xtimate??“超限”聚合物基質離子交換柱
鍵合相
Xtimate??Sugar-Ca?、 Xtimate??Sugar-H
步驟
沖洗封存
定期沖洗
活化程序
流動相
純水純水
鈣柱:0.5g/L EDTA Ca
?(CAS:23411-34-9)
氫柱:純水
流速
N/A
1/4實驗流速
1/4實驗流速
時間
N/A
4h
12h
柱溫
4℃保存
80℃
80℃
04?Xtimate??PS/DVB 色譜柱
步驟
沖洗封存
定期沖洗
活化程序
流動相
80%乙腈
80%乙腈
80%乙腈
流速
N/A
1/4實驗流速
1/4實驗流速
時間
N/A
1h5h柱溫
陰涼干燥保存
30℃
30℃
05?正相色譜柱
步驟
沖洗封存
定期沖洗
活化程序
流動相
正己烷/異丙醇
正己烷/異丙醇
正己烷/異丙醇
流速
N/A
1/4實驗流速
1/4實驗流速
時間
N/A
1h4h柱溫
陰涼干燥保存
30℃
30℃
備柱
*以上方法基于正相模式使用
? 若由于保存不當(堵頭未擰緊、未定期沖洗等),則可能導致柱床已經干涸,重新啟用時,為確保色譜柱填料被充分浸潤,短時間的活化是不夠的,需延長活化時間,再看柱效能否恢復。
? 若長時間不用的色譜柱,直接使用做樣流動相及較大流速可能導致壓力瞬間升高,填料破碎,柱頭塌陷等問題,導致柱效降低且不易恢復。
so,小伙伴們趕快清點一下自己的色譜柱,如果有長時間沒用的抓緊維護起來吧!
作者:裴海洋
排版:趙林
審核:欒建明?朱晗斐?
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