熱點應用丨丹參中丹酚酸 B、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA的測定
前言
丹參(Salvia miltiorrhiza Bunge),唇形科鼠尾草屬多年生直立草本植物,分布于中國安徽,山西,河北,四川,江蘇等地。丹參根主含脂溶性的酮類成分和水溶性的酚酸成分,種根入藥,為強壯性通經劑,有祛瘀,生新,活血,調經的效用。主治子宮出血,血瘀,腹痛。對冠心病有良好的治療效果。此外亦治神經性衰弱失眠,關節痛,瘡癤痛腫等。中藥中活性物質含量對藥效有著重要影響,因此,活性物質含量測定具有重要意義。
本文參考中國藥典(2020版),應用SCION高效液相色譜儀對丹參中活性物質丹酚酸B,隱丹參酮,丹參酮Ⅰ,丹參酮ⅡA進行了分析測定。
實驗部分
01儀器
采用包含以下模塊的賽里安LC6000高效液相色譜儀系統:
? 集成六通道真空脫氣的SCION LC6100四元泵
? SCION LC6210 高精度、低殘留自動進樣器
? SCION LC6310 柱溫箱
? SCION LC6410 紫外檢測器
02
液相色譜條件
03
樣品的預處理
針對丹酚酸B的樣品前處理方法
丹參樣品粉碎→過3號篩→丹參粉末0.15g→加入50 mL甲醇-水(8:2)溶液溶解→超聲提取30min→過濾→用甲醇-水(8:2)把濾液稀釋一倍→HPLC分析。
針對丹參酮類樣品的前處理方法
丹參樣品粉碎→過3號篩→丹參粉末0.3g→加入50 mL甲醇溶解→超聲提取30 min→過濾→HPLC分析→丹參成分分析。
04
標準樣品測定示例
▲ 標準樣品的色譜圖
色譜峰: 1. 隱丹參酮(5mg/L); 2. 丹參酮Ⅰ(5mg/L); 3. 丹參酮ⅡA(5mg/L)
05
樣品添加回收率
對丹參樣品進行添加回收率實驗,在66g/kg的添加濃度下,丹酚酸B的加標回收率為97.59%。在333mg/kg的添加濃度下,丹參酮類物質的加標回收率在80.27%~85.64%之間。
▲ 丹參空白樣品與添加樣品的色譜重疊圖
▲?丹參空白樣品與添加樣品的色譜重疊圖
色譜峰:1. 隱丹參酮;2. 丹參酮Ⅰ;3. 丹參酮ⅡA
06
重現性
(隱丹參酮,丹參酮Ⅰ,丹參酮ⅡA 5 mg/L )
07
標準曲線
08
系統適用性
(丹參酮ⅡA 20 mg/L ;n=5)
結論
使用SCION LC6000-UV對丹參中活性物質丹酚酸B,隱丹參酮,丹參酮Ⅰ,丹參酮ⅡA進行了測定,得到了良好的線性和重現性,理論塔板數滿足藥典要求,為丹參的品質分析提供了解決方法。