熱點應用丨重樓的含量測定
前言
重樓,又稱七葉一枝花,是百合科重樓屬植物的泛稱。本品味苦,性微寒,有小毒,歸肝經,有清熱解毒,消腫止痛,涼肝定驚之功效。常用于疔瘡癰腫,蛇蟲咬傷,跌撲傷痛,驚風抽搐。近年來,隨著研究的深入,重樓的藥用價值被日益重視。《中國藥典》2020版第一部中重樓的含量測定參照高效液相色譜法測定,本報告參考藥典的分析方法對重樓的含量進行測定。
實驗部分
儀器
采用包含以下模塊的賽里安LC6000高效液相色譜儀系統:
? 集成六通道真空脫氣的SCION LC6100四元泵
??SCION LC6210 高精度、低殘留自動進樣器
??SCION LC6310 柱溫箱
??SCION LC6410 紫外檢測器
液相色譜條件
樣品的預處理
藥材樣品粉碎成末(過45目篩),精密稱取2.500g置于具塞錐形瓶中精密加入乙醇25mL,稱定重量,加熱回流30分鐘放冷,再稱定重量,用乙醇補足減失的重量搖勻,過濾,取續濾液,待上機分析。
標準樣品測定示例
▲ 標準樣品的色譜圖(濃度:400 mg/L)
重樓樣品的分析結果
對藥材樣品重樓進行了含量的測定,結果在樣品中未檢測到重樓皂苷Ⅵ成分,其它皂苷成分均得到很好的分離 ,重樓中總皂苷的含量為0.46%。
▲ 重樓的色譜圖
標準曲線
各種重樓皂苷成分在25~400mg/L標準混合液的濃度范圍內,得到了R2 ≥ 0.9998良好的線性關系。
▲ 重樓皂苷Ⅶ的標準曲線
▲?重樓皂苷Ⅵ的標準曲線
▲?重樓皂苷Ⅱ的標準曲線
▲?重樓皂苷Ⅰ的標準曲線
系統適用性
(400 mg/L 標準混合液)
對系統適用性試驗進行了確認,理論塔板數按重樓皂苷Ⅰ峰計算,結果得到色譜柱的理論塔板數達到藥典規定值,如表所示。
重復性
(400 mg/L 標準混合液,n=6)
結論
使用SCION LC6000-UV對重樓中的重樓皂苷進行了測定,得到了良好的線性和重現性,理論塔板數滿足藥典要求,為重樓的品質分析提供了解決方法。
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