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食品安全專欄 | 食品中泛酸的測定

默克化學與分析

2023.6.29

前言

泛酸又叫維生素B5，是一種水溶性維生素，化學式為C9H17NO5，因廣泛存在于動植物中而得“泛酸”之名。其主要生理功能是構成輔酶A和酰基載體蛋白，并通過它們在代謝中發揮作用，參與體內碳水化合物、脂質和蛋白質代謝。

由于泛酸無法通過人體自身合成, 需從食物中獲得, 所以許多食品會添加泛酸, 常見于嬰幼兒配方食品、特殊醫學配方食品、嬰幼兒谷類輔助食品、孕婦及乳母營養補充食品、保健食品等配方食品。

GB 5009.210—2016《食品安全國家標準?食品中泛酸的測定》規定測定泛酸的主要方法是微生物法和高效液相色譜法。微生物法是測定泛酸的經典方法，可檢測所有食品, 但微生物法耗時長, 樣品含量高時由于線性范圍窄, 可能造成定量不準確。高效液相色譜法靈敏度高, 是測定營養素補充劑類保健食品及配方食品中泛酸的常用方法, 但當樣品中含有大量小分子時, 雜峰會影響定量，如測定部分水解蛋白和深度水解蛋白奶粉樣品，基質峰與目標物不能有效分離。

我國在2021年發布的新國標征求意見稿GB 5009.210—xxxx?《食品安全國家標準?食品中泛酸的測定》中，增加了液相色譜-質譜方法作為第一法，可對各類復雜基質中的泛酸進行測定。液相色譜-質譜法同時具有高選擇性和高靈敏度的特點, 能夠短時間內準確測定泛酸含量。同位素內標的使用可排除基質干擾, 進一步提高方法的準確性。

默克根據國標征求意見稿第一法，采用液相色譜-串聯質譜檢測深度水解蛋白奶粉中的泛酸，并使用同位素內標對其進行定量。樣品前處理中使用到的堿性磷酸酶（貨號：P7640-10G），來源于牛腸粘膜，EC號3.1.3.1，酶活力≥10 U/mg，完全符合標準要求；此外標準品泛酸鈣（貨號：PHR1232）為有證標準物質，13C?, 1?N?-泛酸鈣同位素內標有試劑級別（貨號：705837-10MG）和有證標準物質（貨號：V-063-1ML）兩種可選，均符合國標對于標準品的要求。

實驗部分

樣品前處理：

色譜/質譜參數：

檢測譜圖：

標準曲線：

標準溶液TIC圖（c=10 μg/L）

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實際檢測樣品TIC圖譜（深度水解蛋白的奶粉c=20.5 μg/L）

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結論

本方法建立了液相色譜-質譜測定嬰幼兒配方乳粉中泛酸的檢測方法。微生物法測定需至少1天, 而液相色譜-質譜法2~3 h即可完成；方法也適用于米粉、固體飲料和特殊醫學配方食品等基質，適用性更廣、檢出限更低，適合批量檢測。

實驗中用到的Ascentis? Express C18柱（貨號：50813-U）為表面多孔色譜柱，和傳統的全多孔硅膠柱相比，其擴散路徑更短，可以在同等壓力條件下達到兩倍的分離速度，且柱效不受影響。和國標GB 5009.210—xxxx征求意見稿相比，本方法色譜分離時間減少了將近一半，因此可實現更高效的分析。