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如何快速高效的檢測食品中的葉酸?

華譜科儀
2022.9.14

前言

葉酸是含有碟酰谷氨酸結構的一類化合物統稱。食物中的葉酸絕大多數是以喋酰多谷氨酸的形式存在的。目前《GB5009.211-2014》國標中測定葉酸方法為微生物法,此方法操作繁瑣,檢測周期長。因此,開發出一種高效快速的葉酸測定方法具有重要意義。

接下來,小編將帶您來了解一種快速測定食品中葉酸的方法。該方法采用華譜S6000Plus超高效液相色譜儀以及Alphasil VC-C18色譜柱來進行葉酸的測定,可實現快速、高效檢測。

分析條件

圖1. S6000Plus超高效液相色譜儀

實驗結果

①?實際樣品測定

檢測濃度為20.0 ng/mL的葉酸標準溶液,結果如圖2(a)所示,葉酸保留時間為12.54 min,峰形良好且無雜質干擾。

按照前處理步驟分別處理蘋果、白菜、黃豆、A品牌奶粉和B品牌奶粉空白樣品,得到色譜圖如圖2(b-f)所示,可以看出,樣品中的葉酸色譜峰附近無雜質干擾,前處理凈化效果良好。

圖2.(a) 20 ng/mL葉酸標準溶液色譜圖;(b)?蘋果樣品中葉酸色譜圖;(c)?白菜樣品中葉酸色譜圖;(d)?黃豆樣品中葉酸色譜圖;(e)?奶粉A樣品中葉酸色譜圖;(f)?奶粉B樣品中葉酸色譜圖

峰1:葉酸

②?檢出限和定量限

本方案中,奶粉是所有檢測食品中靈敏度最低的,經過前處理富集純化,上機檢出限濃度為0.5 ng/mL,定量限濃度為1.0 ng/mL。經過測定得到檢出限信噪比為4.65,定量限信噪比為10.20。本方案檢出限和定量限與國標《GB5009.211-2014》的對比如表1所示,檢出限和定量限色譜圖如圖3所示,滿足檢測要求。

表1.? 檢出限和定量限

圖3.(a)檢出限0.5 ng/mL葉酸色譜圖;(b)?定量限1.0 ng/mL葉酸色譜圖

③ 線性

將葉酸配制成0~500.0 ng/mL濃度范圍的標準溶液進行線性考察,以峰面積對濃度做標準曲線(如圖4所示),在0~500.0 ng/mL濃度范圍內線性良好,線性相關系數R2為0.9997。

圖4. 葉酸標準曲線

④?重復性

在蘋果基質添加1.0 μg/mL的葉酸標準品,進行6次重復性實驗,保留時間RSD為0.06%,峰面積RSD為0.82%,結果符合標準要求,色譜圖如圖5所示。

圖5.? 葉酸重復性色譜圖

峰1:葉酸

⑤ 加標回收率

分別以白菜、蘋果、奶粉A、奶粉B以及黃豆為基質進行加標回收率考察,每種基質平行三份。測定結果如圖6所示,回收率均在75~120%之間,滿足國標要求。

圖6. 回收率測定結果

結論

采用華譜 S6000Plus 超高效液相色譜儀,搭配 Aphasil VC-C18(3.0 × 150 mm, 2.5 μm, 100?)色譜柱,可以實現食品中的葉酸快速高效檢測。測定方法的重復性、線性以及加標回收率均滿足標準要求,檢出限為0.5 ng/mL,定量限為1.0 ng/mL。該高效液相色譜法測定食品中葉酸含量具有較高的準確度和精密度,因此本方案滿足食品中葉酸的檢測要求,并具有廣泛的應用前景。

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