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多肽雜質分析
多肽雜質分析
????根據美國藥典（USP）多肽藥物指在不考慮工藝的條件下，氨基酸數目≤40屬于多肽藥物；當采用化學合成方法制備時，其多肽藥物指氨基酸數目<100。
多肽類藥物的發展越來越受到醫藥界的關注，多肽藥物的分子量介于小分子和蛋白藥物之間，顯示出許多獨特優勢：例如相較于小分子藥物，多肽藥物的特異性強、活性高；而相較于蛋白藥物，多肽藥物的免疫原性較低、能大規模的化學合成且純度高。由于多肽合成技術、工藝等的進步，多肽藥物的研發持續升溫。
不同于小分子藥物，多肽藥物在合成過程中易產生差向肽、缺失肽等雜質，且通常這些雜質與目標產物結構、化學性質類似，需經過復雜的提純過程才能得到合格產品。故雜質對多肽藥物的安全性、有效性具有直接影響，雜質研究也是技術審評中的重點關注內容。多肽雜質來源大致可分為三塊：起始物料（有關物質、光學異構體、殘留溶劑等），制備工藝（合成路線、偶聯溫度時間、裂解工藝等），以及儲存條件（儲存包裝、儲存溫度、儲存濕度等）。
? ? 為了控制多肽雜質，儀器商也提供了相應的解決方案，我們可以參考：
THERMO賽默飛
肽類藥物的制備目前主要有化學合成、基因重組和從動植物中提取三種方法。其中固相多肽合成技術的產生極大推動了多肽藥物的發展，利用賽默飛特色的雙三元液相色譜多組分中心切割二維在線除鹽方法，可實現一次進樣即可完成多組分除鹽的目的，電霧式檢測器（CAD）作為一種通用型檢測器可輔助建立除鹽方法，評價除鹽效果。
在確定了二維除鹽條件后，利用Orbitrap高分辨質譜的高分辨率、出色的靈敏度、高質量精度等優勢性能，對已在線脫鹽的未知雜質組分進行精確的鑒定。大大的提升了樣品的穩定性和分析效率。
液相方法
第一維液相方法同2015版藥典，各雜質分離良好，其中面積歸一化含量在0.1%以上的雜質共為11個，因此本實驗主要對11個雜質進行定性鑒別。第二維除鹽過程采用AcclaimC18（300?），乙腈-0.1%甲酸作為流動相進行梯度分析，輔以CAD檢測，確定了二維的最佳除鹽和分離條件。
質譜方法
一級全掃描：分辨率70,000;掃描范圍:300-1700m/z;
二級為數據依賴型掃描模式，分辨率35,000;歸一化碎裂能量（SteppedNCE）：20,23,26;動態排除10s
采用6個loop環的多中心切割方法，一次進樣可完成多目標雜質的在線除鹽，顯著的提高鑒定的通量，同時與Orbitrap高分辨質譜聯用，強強聯合，提高雜質鑒定的通量和準確度，為后續的實驗提供有力的數據支撐。
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