寡核苷酸中雜質的HPLC分析
核苷酸片段缺失體
反義核酸等核酸藥物的開發和品質管理中,需要開發盡可能從合成的目標寡核酸中分離出雜質的方法。以下是使用聚合物基質HILIC色譜柱HILICpak VN-50 2D進行20mer的目標合成寡DNA和19mer (n-1)、18mer (n-2)、17mer (n-3)的核苷酸片段缺失體HPLC分析的應用實例。HILIC模式基本上親水性越強保留時間越長,所以按照各合成寡DNA聚合度由低到高順序洗脫。本實驗條件不需要離子對試劑,也不需要在流動相中添加高濃度鹽,適用于寡核酸的LC/MS分析。
Sample : Synthesized oligo-DNAs (crude), 1 μL1. 20mer, ATACCGATTAAGCGAAGTTT2. 20mer, ATACCGATTAAGCGAATTTT3. 20mer, ATACCGATTAAGCTAATTTT4. 20mer, ATACCGATTAATCTAATTTT
堿基序列差異
以下是使用聚合物基質HILIC色譜柱HILICpak VN-50 2D進行20mer的目標合成寡DNA和三種堿基序列差異(1,2,3處差異)合成寡DNA的HPLC分析的應用實例。導入不同類型的堿基會導致樣品親水性的變化,所以使用HILIC模式可以分離各種寡DNA。本實驗條件不需要離子對試劑,也不需要在流動相中添加高濃度鹽,適用于寡核酸的LC/MS分析。
Sample : Synthesized oligo-DNAs (crude), 1 μL1. 20mer, ATACCGATTAAGCGAAGTTT2. 20mer, ATACCGATTAAGCGAATTTT3. 20mer, ATACCGATTAAGCTAATTTT4. 20mer, ATACCGATTAATCTAATTTT
掃碼關注Shodex
獲取更多色譜資訊