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應(yīng)用分享︱采用TSKgel G6000PWXL凝膠色譜柱高效分離檢測牛奶外泌體
概述>>
外泌體（Exosomes）是一種活細胞產(chǎn)生的直徑為40~150 nm微小囊泡，通過攜帶的蛋白質(zhì)、脂類、RNA等參與細胞間的信息交流和物質(zhì)交換。大量研究證實，外泌體對疾病治療具有決定性幫助，特別是在疾病早期診斷和作為藥物載體進行靶向治療方面擁有廣闊的應(yīng)用前景。牛奶外泌體是由乳腺中多種類型細胞分泌囊泡型納米顆粒。作為一種食物來源的顆粒，牛奶外泌體是藥物遞送與消化道疾病治療的理想載體。
本應(yīng)用介紹了通過SEC-HPLC對牛奶外泌體進行高效分離檢測的方法。
01
?樣品的制備
牛奶外泌體參考方法[1]制備。
02
?分析條件
色譜柱：TSKgel G6000PWXL (7.8 mm I.D.×30 cm, 8 μm)
流動相：1×PBS（pH 7.4）
流速：1.0 mL/min
進樣體積：100 μL
03
?分析結(jié)果
牛奶外泌體的SEC-HPLC色譜圖
結(jié)果與討論>>
在本應(yīng)用中，作者采用凝膠色譜柱TSKgel G6000PWXL檢測不同批次牛奶提取外泌體，均呈單一均質(zhì)峰。通過SEC-HPLC檢測聚氧化乙烯標準品，并根據(jù)各標品的尺寸和保留時間擬合標準曲線推算，牛奶外泌體保留時間約為8 min，粒徑在100 nm左右。
參考文獻：
1. 楊晶 等/ 規(guī)模化制備高純度牛奶外泌體工藝方法的建立及分子與細胞生物學活性鑒定,吉林大學學報,2021,47(3):777-787.
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