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【新品預告】細胞匯合度檢測的工作流程：Mateo TL幫您輕松搞定日常細胞培養(yǎng)！
檢測細胞匯合度是細胞培養(yǎng)工作流程中的一個常規(guī)步驟，常見于生命科學研究和生物制藥行業(yè)實驗室中的各種應用[1,2]。無論研究人員擴增或準備細胞是為了進行下一步的轉染、分化、劃痕實驗、克隆選擇、菌落挑選或3D培養(yǎng)類器官，監(jiān)測細胞的生長都至關重要[3,4]?。
細胞匯合度檢測的工作流程步驟：1.細胞接種，2.細胞生長，3.細胞匯合度檢測，4.數據處理，5.科學實驗[5,6]。
1
細胞接種
在首選細胞培養(yǎng)皿上接種細胞，并將其置于培養(yǎng)箱中。?
請注意，細胞接種密度對增殖非常重要。
2
細胞生長
讓細胞沉淀下來，附著在培養(yǎng)皿上，并開始生長。可以使用Mateo TL的相差模式來觀察細胞形態(tài)和生長（圖1），并通過輔助對比設置來幫助觀察。通過捕獲圖像來記錄細胞培養(yǎng)的狀態(tài)。
圖1：細胞生長快速檢測的示例。不同匯合狀態(tài)的MDCK細胞。使用Mateo TL的相差模式采集細胞培養(yǎng)圖像。
3
細胞匯合度檢測
在細胞培養(yǎng)中，匯合度是指培養(yǎng)皿中細胞層所覆蓋表面積的百分比[2]。
使用Mateo TL匯合度模塊，檢查細胞培養(yǎng)物的匯合程度。
調節(jié)邊界檢測的靈敏度，應用匯合度測量。
圖2：Mateo TL及其細胞匯合度檢測的界面（Confluency視頻鏈接）。?
Mateo TL的匯合度算法可自動計算圖像中細胞覆蓋面積的百分比。因為細胞可以在多個區(qū)域不均勻地分布生長，建議在低放大倍率下和培養(yǎng)皿的不同區(qū)域計算匯合度。
對于報告和細胞培養(yǎng)跟蹤，建議保存兩張圖像：使用相差的當前細胞生長狀態(tài)圖像（圖3，上方）和通過匯合度計算所生成的圖像（圖3，下方）。
圖3：HeLa細胞的匯合度檢測示例上排所示為相差圖像，下排所示為細胞匯合度的判定。Mateo TL算法可測量細胞覆蓋面積的百分比。
4
記錄和數據處理
在使用圖像記錄細胞培養(yǎng)狀態(tài)并測量細胞匯合度之后，有兩種模式可以快速便捷地導出圖像。
可通過快速共享功能將圖像直接無線傳輸到智能手機或平板電腦上，或者拷貝到USB設備。
如果需要重復采集圖像，那么可以使用重復功能輕松再現圖庫中先前參考圖像的成像條件，即光強和相機設置。
5
科學實驗
在記錄當前培養(yǎng)狀態(tài)并使用Mateo TL匯合度模塊測量細胞匯合度之后，可以開始判斷下一步如何進行。常規(guī)的細胞培養(yǎng)操作有換液、維持、擴大培養(yǎng)或傳代細胞、凍存或停止培養(yǎng)。如果細胞已經達到理想的匯合狀態(tài)，則可以開始下游的科學實驗或進行其常規(guī)操作。將一個特定的匯合度作為標準對后續(xù)的實驗至關重要，例如基因轉染、克隆選擇、建立細胞系、菌落挑選、重編程和分化。
對于菌落挑選或其他需要同時進行樣品處理和顯微鏡觀察的方案，建議清潔Mateo TL顯微鏡（鏡身可以用75%的酒精進行擦拭消毒，顯示屏也包括在內）并在層流柜內操作。數字式顯示取代了使用目鏡，最大限度地減少了眼睛的疲勞，節(jié)省下來的空間讓顯微鏡能在層流罩內使用，最大限度降低了污染風險（圖4）。
圖4：Mateo TL置于層流罩內，以方便進行細胞培養(yǎng)。
Mateo TL數字式透射光倒置顯微鏡
讓細胞培養(yǎng)的常規(guī)檢測更容易且一致。
Mateo TL能輕松完成細胞培養(yǎng)檢測，并能確保匯合度評價的一致性：
即用型顯微鏡：從設置到第一幅圖像用時不超2分鐘。
匯合度模塊可輔助常規(guī)匯合度檢查，從而確定實驗節(jié)點讓工作流程更加標準化。
通過一個共同的測量標準，可以使不同用戶和實驗之間的匯合度測量保持一致。
讓匯合度評價不再需要靠猜，從而最大限度地減少人為誤差。
常規(guī)細胞培養(yǎng)？輕松搞定！
免責聲明：
本文描述了快速檢測細胞匯合度的通用工作流程。歡迎使用文中的推薦信息，幫助您改善科學實驗。另請注意，文中的信息并不能替代您實驗室中采用的細胞培養(yǎng)指南或SOP，也不能替代您的技術專長或知識。如按本文信息進行實驗而導致非預期或不良結局，Leica Microsystems概不負責。
參考文獻：（上下滑動查看更多）
1.?Segeritz, CP, Vallier, L, Cell Culture: Growing Cells as Model Systems In Vitro, Ch. 9 in Basic Science Methods for Clinical Researchers (2017, Elsevier) pp. 151-172, DOI: 10.1016/B978-0-12-803077-6.00009-6.
2.?Geraghty RJ, Capes-Davis A, Davis JM, et al. Guidelines for the use of cell lines in biomedical research, Br. J. Cancer (2014) vol. 111, iss.6, pp. 1021-1046, DOI:10.1038/bjc.2014.166.
3.?C.D.Helgason (Ed.), C.L.Miller (Ed.), Basic Cell Culture Protocols (Methods in Molecular Biology) 4th?ed. (2013, Springer Nature) DOI: 10.1007/978-1-62703-128-8.
4.?G. Vunjak-Novakovic (Ed.), R.I.Freshney (Ed.), Culture of Cells for Tissue Engineering (2006, John Wiley & Sons) DOI: 10.1002/0471741817.
5.?T. Straube, C. Müller, How to do a Proper Cell Culture Quick Check: Workflow for subculture of adherent cells, Science Lab (2016) Leica Microsystems.
6.?C. Greb, Introduction to Mammalian Cell Culture: Morphology and Cell Types & Organization, Science Lab (2017) Leica Microsystems.
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