有關液相和氣相的保留時間
保留時間
保留時間(T):從進樣開始到某個組分的色譜頂點的時間間隔稱為該組分的保留時間。即從進樣到柱后某組分出現濃度極大時的時間間隔。
調整保留時間(t):某組分由于溶解(或者吸附)于固定相,比不溶解(或者不吸附)的組分在柱中多停留的時間稱為調整保留時間;
調整保留時間=保留時間—死時間;(Vd)。
液相色譜中保留時間的波動與哪些因素有關?
一般而言,與如下因素有關:
1 操作因素;
2 色譜柱的質量;
3 儀器系統,尤其是輸液泵的性能。
怎樣解決液相色譜保留時間的漂移?
保留時間飄移可能的原因有:
1 柱子沒有達到平衡;
解決:平衡更長的時間來解決。
2 實驗環境溫度發生變化;保留時間和溫度有很大的關系,一般溫度高,出峰快。
解決:這里的溫度不僅指柱溫,其實還包括流動相溫度。柱溫一般都有規定,用柱溫箱就可以平衡了,但是流動相溫度沒有規定,很多人不知道也要保持不變。在空調房里做,保持住室溫不變,一般會好很多。
3 流動相比例發生變化;
解決:配置時盡量混合均勻;配置時盡量保證比例沒有偏離;使用時盡量保證導管接口處不揮發泄漏;長時間不用的要密封,最好廢棄不用。
4 長期使用后柱子損耗;
解決:重新,再生柱子,或更換新的。
也可參考以下文章:
液相保留時間不重現的解決辦法
氣相色譜儀引起保留時間不重復的最可能原因只有兩個:
1.柱溫不穩定
2.流速有變化。
有關氣相色譜保留時間請查看以下文章:
氣相保留時間波動
最后,我們來看下如何鎖定保留時間??
所謂保留時間鎖定,就是使特定化合物的保留時間在不同儀器、不同色譜柱(但標稱固定相和相比相同)之間保持不變。為了討論這一技術的基本原理,要從影響保留時間重現性的因素說起!
化合物的性質、固定液的性質和操作條件;
如果前兩個因素不變(對于特定的化合物和GC儀器系統,這當然是成立的);
只有操作條件會變,即,載氣流速、柱溫、毛細管柱規格和檢測器類型等。
載氣控制:
對于同種載氣來說,壓力和流速是影響保留時間的參數;
不同廠家的壓力表和流量計的制造精度有所不同,故當不同儀器的壓力和流量顯示完全一致時,柱內流量也不盡相同;
現在有了EPC,這一問題基本得到了解決;
雖然同一廠家制造的EPC不可能每項都嚴格一致,但差異微小,通過壓力的自動調節完全可以補償這一差異。
溫度控制:
保留時間對溫度極為敏感,過去采用水銀溫度計測量柱溫時,重現性顯然有問題。現在都用熱敏元件與電子線路來控制溫度,精度大為提高。不同儀器間溫度重現性令人滿意。即使有0.5℃的溫度差異,我們仍能通過調節柱前壓的辦法來使保留時間達到重現。
色譜柱規格:
一、不同廠商的色譜柱,盡管標稱規格一致,但難免有內徑的不均勻、固定液膜厚的變化、以及柱長的不精確,這些都會造成保留時間的波動。
二、同一根色譜柱在使用過程中會發生變化,比如,重新安裝或因柱污染而截去1~2cm后,若其他操作條件不變,保留時間就不能重現了。
目前,同一廠商的色譜柱制造重現性已相當高,而不同廠家的色譜柱尚不能完全重現,尤其是極性柱。但我們如果采用同一廠家的色譜柱,就可基本解決這一問題。至于色譜柱長度的變化,可以通過調節柱前壓來補償。
檢測器類型:常規檢測器:常壓下工作;?
MS:高真空下工作;
AED:高于大氣壓(如,10kPa)下工作。這樣,當比較常規檢測器和MS或AED所得結果時,即使柱前壓嚴格一致,柱壓降也不同,保留時間就不能重現。采用EPC時,就很容易通過調節壓力使柱壓降保持相同。
通過上述分析我們可以得出結論,只要儀器的載氣和溫度控制精度足夠高,只要色譜柱標稱規格一致,就可以通過調節柱前壓的方法來補償操作參數的微小變化,從而實現保留時間的重現,這就是RTL的基礎。