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蛋白SEC-MS分析怎么做？首選Premier SEC色譜柱

沃特世技術服務
2022.3.15

液質聯用法(LC-MS)是常用的蛋白非變性分析方法，而體積排阻色譜(SEC)則是此類方法的首選技術。由于流動相需兼容MS檢測，所以通常采用乙酸銨代替其中的氯化鈉，以產生更簡單且電荷態更低的離子，從而得到更高質量的去卷積質譜圖。

常規色譜柱非常容易與蛋白產生吸附，流動相換成乙酸銨溶液后色譜峰拖尾更明顯，降低回收率，影響了SEC-MS數據的可靠性。Premier SEC色譜柱可以解決上述難題，它采用親水性MaxPeak高性能表面技術，消除了這些額外的次級作用。即便用乙酸銨做流動相仍能確保峰形的對稱，這大大提高了檢測的靈敏度。從液相色譜圖可以看出，采用Premier SEC色譜柱分析0.075 μg的蛋白仍有明顯峰形，而常規色譜柱則無法檢出。

圖1. 抗體的LC-UV檢測色譜圖（A: Premier SECB常規SEC, 色譜柱無MaxPeak高性能表面）。

圖2. Premier SEC在Bioaccord上250次運行的XIC色譜圖重現性數據。

（上下滑動查看圖片）

由此看出，Premier SEC采用親水性MaxPeak技術后，SEC-MS分析只需考慮兼容MS流動相，使這一方法具有更低的檢測限、更對稱的峰形和更高的回收率。

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