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當我還在糾結細胞器標記物抗體怎么選,師兄師姐反手把它甩了過來…

賽默飛生命科學
2023.8.17

“細胞器那么多,傻傻分不清呀!”

“細胞器標記物更是紛繁復雜,如何記得住。”

“免疫熒光全靠想象,真想先睹為快。”

想要獲得一張漂亮的細胞成像圖片,除了需要知道靶蛋白的位置,還少不了檢測細胞器的定位。以細胞器為參照,我們才能清楚靶蛋白的定位。細胞器及其標記物種類多樣,借此契機小編整理了常見的細胞器標記物及其熱門抗體,助你快速識別細胞器。文末還有細胞器標記物海報和細胞染色模擬工具助你一覽全貌,心中有數!

細胞膜

細胞膜介導或參與的活動,比如轉運蛋白、受體、錨定蛋白、激酶等。一些細胞連接標記物,胞膜窖(Caveolin)等可作為細胞膜標記物。如胞膜窖是膜上小而特殊的結構,參與脂質代謝,囊泡運輸,信號轉導等多種生物學功能。三種胞膜窖蛋白因組織類型不同而表達各有差異,故選擇抗體時需注意。

細胞核

細胞核是遺傳信息的主要存儲部位,能夠維持和調節基因表達從而控制細胞的活動。常見的標記物包括組蛋白 H3,去甲基化酶LSD1,位于細胞核膜的核纖層蛋白LaminA/C等。

細胞核標記抗體檢測特定位于細胞核的蛋白質,有助于研究細胞核及其結構的形態和動力學。細胞核標記抗體能幫助實現對全細胞的核變化監測。

細胞骨架

細胞骨架為細胞、細胞內轉運成分和細胞分裂提供支持,由微管、中間絲和微絲(肌動蛋白)組成。微管參與許多細胞功能,包括維持細胞結構、細胞內轉運和細胞分裂過程中有絲分裂紡錘體的形成。微管蛋白α、β為常用的細胞骨架標記物。

中間絲有助于維持組織細胞的內部三維結構,錨定細胞器和細胞核等。由角蛋白異二聚體組成,因其表達組織的不同而類型有所區分,如細胞角蛋白Cytokeratin主要表達于上皮細胞,為關鍵的腫瘤標記物。

細胞骨架標記抗體有助于闡明蛋白質在以細胞骨架為中心或在受其影響的活動中可能發揮的作用。

線粒體

線粒體是由雙膜包圍的膜結合細胞器。外膜相對光滑,但內膜十分曲折,形成褶皺(嵴),顯著增加內膜的表面積。線粒體主要合成ATP提供能量,也參與細胞任務,如信號傳導、分化、凋亡以及細胞周期和生長的控制。常見的線粒體標記物包括細胞色素C氧化酶COX4, 氫離子轉運ATP酶(如ATP5A1),熱休克蛋白60,電壓依賴性陰離子通道蛋白VDAC,線粒體內膜蛋白Mitofilin等。

利用線粒體標記物抗體可以幫助研究線粒體的形態和動力學,以及研究線粒體相關的生理和病理現象。

溶酶體

溶酶體是細胞代謝所必需的膜結合細胞器,含有能夠從細胞內外消化幾乎所有類型生物分子的水解酶,包括未使用的蛋白質、受損的細胞器和細胞質中其他不需要的物質。作為自噬途徑中的一個關鍵步驟,含有待處理細胞材料的自噬體與溶酶體融合,并被溶酶體的水解酶降解。這一過程對于健康的細胞功能是必要的。

溶酶體相關膜蛋白LAMP1和LAMP2是最常見的溶酶體標記物。

高爾基體

高爾基復合體是細胞分泌途徑中的關鍵細胞器。它從內質網接收蛋白質并對其進行處理和分類,以便進一步轉運到溶酶體、質膜或返回內質網。

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每個高爾基體都有特定的標記。高爾基標記抗體檢測高爾基復合體特有的蛋白質,有助于研究高爾基復合體各部分的動力學、形態學和分子機理。

過氧化物酶體

過氧化物酶體存在于大多數真核細胞中,主要參與脂肪酸的代謝和調節氧化應激。在植物細胞中,過氧化物酶體協助葉綠體進行光呼吸,并將脂肪酸轉化為糖。在哺乳動物中,它們在保持腦和肺的正常功能方面至關重要,并在能量代謝中發揮重要作用。過氧化物酶catelase是常見的標記物。

核糖體

核糖體是蛋白質合成的主要場所,由rRNA和蛋白質復合物構成。核糖體由兩個亞單位組成:較小的40S亞單位結合并讀取mRNA,較大的60S亞單位結合tRNA和氨基酸。核糖體標記抗體檢測核糖體特有的蛋白質,有助于研究核糖體的形態、動力學及分子機理。核糖體蛋白S3,核糖體蛋白L7等是較為常見的標記物。

自噬體

自噬是降解包括受損細胞器在內的大量細胞質內容物的過程。自噬體包裹被降解的物質,然后與含有水解酶和其他降解酶的溶酶體融合。在細胞分化、衰老和死亡等過程中起著至關重要的作用。自噬過程缺陷與一些人類疾病有關,包括肌肉疾病、癌癥、神經退行性疾病和病原體感染。

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自噬標記抗體檢測自噬體特有的蛋白質,有助于研究自噬體的結構、功能和形成。自噬標記抗體也可以幫助檢測細胞中的自噬活性。最常見的自噬體標記物如LC3B,Atg5等。

外泌體

外泌體是由脂質雙層分子組成的小囊泡。外泌體是當某些內涵體與質膜融合,釋放到細胞外環境中時形成的。它們也可以直接從質膜釋放。

外泌體除了脂質和RNA分子外,還含有各種細胞質和膜蛋白。其存在于體液中,如血液、尿液、唾液、羊水等。在凝血和細胞間信號傳導等過程中發揮重要作用。常被作為治療、預后和疾病標志物。常見的標志物有CD9,CD81,HSC70等。

黑色素體

黑色素體是合成、儲存和運輸黑色素的細胞器。存在于皮膚黑色素細胞、脈絡膜黑色素細胞、視網膜色素上皮細胞和低等脊椎動物的黑色素細胞中。

黑素體對于保護皮膚免受紫外線輻射至關重要。黑色素體標記抗體檢測特定的黑色素體,有助于研究黑色素體的結構和功能。常見的標記物有黑色素細胞抗原MelanA,黑色素細胞蛋白PMEL,酪氨酸酶TYRP1等。

資源01

細胞器標記物海報,全面而有用,

02

Stain-iT細胞染色模擬工具

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查看更多:https://www.thermofisher.cn/cn/zh/home/life-science/cell-analysis/cellular-imaging/guide-stain-it.html

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