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前沿合作 | LCMS-QTOF鑒定卡絡(luò)磺鈉原料藥有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)
島津中國創(chuàng)新中心與安徽省食品藥品檢驗(yàn)研究院、四川聯(lián)成迅康醫(yī)藥股份有限公司和成都天臺(tái)山制藥有限公司合作，采用島津高效液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀LCMS-QTOF對(duì)卡絡(luò)磺鈉原料藥的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。
背景介紹
卡絡(luò)磺鈉是1992年由日本田邊制藥株式會(huì)社研發(fā)上市，在臨床上主要用于治療外傷手術(shù)出血等，通過降低毛細(xì)血管通透性，達(dá)到止血目的。?《日本藥局方》（JP XVII）采用液相色譜法HPLC進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)的控制，《中國藥典》尚未收錄卡絡(luò)磺鈉。國家標(biāo)準(zhǔn)采用薄層色譜法TLC檢測(cè)卡絡(luò)磺鈉注射液有關(guān)物質(zhì)，該方法相對(duì)簡(jiǎn)單且有關(guān)物質(zhì)研究尚不深入。本文使用卡絡(luò)磺鈉原料藥強(qiáng)制降解樣品，建立了卡絡(luò)磺鈉有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)的色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析方法。通過高分辨質(zhì)譜儀LCMS-QTOF測(cè)定各有關(guān)物質(zhì)的準(zhǔn)確質(zhì)量數(shù)推測(cè)其分子式，以及結(jié)合MS/MS特征碎片，綜合鑒定出八種有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。
圖1. 卡絡(luò)磺鈉破壞實(shí)驗(yàn)HPLC色譜圖
（363 nm, A.供試品溶液B.光照破壞C. 高溫破壞D.氧化破壞E. 堿破壞F. 酸破壞）
解決方案
分析儀器
島津液相系統(tǒng)Nexera LC-40
+高分辨質(zhì)譜儀LCMS-9030
基于LCMS-9030質(zhì)譜的高分辨率，高質(zhì)量準(zhǔn)確度和二級(jí)特征譜圖定性的功能，采用乙酸銨/乙腈質(zhì)譜兼容流動(dòng)相體系，建立卡絡(luò)磺鈉與有關(guān)物質(zhì)分離條件。通過比較卡絡(luò)磺鈉與有關(guān)物質(zhì)的母離子和特征碎片離子的相關(guān)性，對(duì)卡絡(luò)磺鈉八種有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行科學(xué)合理的定性分析。表1列出了八種有關(guān)物質(zhì)的分子式、誤差和特征碎片離子。
表1. 卡絡(luò)磺鈉有關(guān)物質(zhì)的高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)
以有關(guān)物質(zhì)8的解析過程為例，有關(guān)物質(zhì)8在ESI-模式無響應(yīng)，因此對(duì)ESI+模式的譜圖進(jìn)行解析。有關(guān)物質(zhì)8的[M+H]+ 的m/z為219，[M+Na]+的m/z為241，分子式預(yù)測(cè)結(jié)果為C10H10N4O2，較卡絡(luò)磺鈉少H2SO3。降解實(shí)驗(yàn)證實(shí)該有關(guān)物質(zhì)可由卡絡(luò)磺鈉高溫、光照、酸、堿破壞得到，可能的生成機(jī)理是卡絡(luò)磺鈉先降解生成有關(guān)物質(zhì)1，再脫磺酸生成有關(guān)物質(zhì)8。該結(jié)構(gòu)含有活潑氨，因此不易在ESI-下電離，這與質(zhì)譜觀測(cè)結(jié)果一致。有關(guān)物質(zhì)8可能的結(jié)構(gòu)和裂解規(guī)律見圖3，各碎片峰均得到合理歸屬。有關(guān)物質(zhì)8為高溫破壞生成的主要有關(guān)物質(zhì)。
卡絡(luò)磺鈉臨床主要的劑型是凍干，小水針和輸液劑型，而小水針和輸液劑型生產(chǎn)工藝需采用高溫滅菌處理，提示有關(guān)物質(zhì)8既是降解雜質(zhì)又是工藝雜質(zhì)，有必要對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制。
圖2. 有關(guān)物質(zhì)8的MS（A）和母離子m/z 219的MS2(B)質(zhì)譜圖（ESI+模式下）
圖3. 卡絡(luò)磺鈉有關(guān)物質(zhì)8可能的結(jié)構(gòu)和裂解規(guī)律
結(jié)論
卡絡(luò)磺鈉是臨床止血常用藥物，島津中國創(chuàng)新中心與客戶合作使用高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜儀LCMS-9030成功對(duì)卡絡(luò)磺鈉有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，對(duì)于提高卡絡(luò)磺鈉藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和指導(dǎo)企業(yè)的質(zhì)量控制及成品放行均具有積極的意義。
參考文獻(xiàn)：
冀峰, 徐海英, 李瑋, 等. LCMS-QTOF 鑒定卡絡(luò)磺鈉原料藥的有關(guān)物質(zhì)[J]. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué), 2022, 39(7):934-941.
往期回顧
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