細胞外囊泡的尺寸排阻色譜分析及適用的TSKgel色譜柱產品
細胞外囊泡(Extracellular Vesicles; EVs)是由細胞中釋放出來的小囊泡。近年來的研究表明,EVs含有mRNA和miRNA,并具有細胞間的信息傳遞功能。特別是直徑在30~150 nm的EVs,也就是外泌體(Exosome),已被發現與細胞的活性化、不活性化以及免疫調控有關。另外,由于癌細胞的EVs與細胞轉移及癌變有關,所以除了在診斷和治療預后階段可作為腫瘤標志物進行檢查以外,研發人員還對其是否可應用于給藥系統進行著相關研究。
▼ 細胞外囊泡的種類及來源
Ref: Journal of Japanese Biochemical Society 91(4): 514-518 (2019)、doi:10.14952/SEIKAGAKU.2019.910514
01
分離分析EVs時使用的色譜分離模式
EVs的分離純化常會用到液相色譜法,其中尺寸排阻色譜最受關注。下表中列出了分析、分離EVs時使用的色譜分離模式和特點,以及適用的TSKgel SEC色譜柱。
02
可用于分離分析EVs的SEC色譜柱
當分離較小的EVs或外泌體時,可使用G4000SWXL色譜柱。分離較大的EVs時,可使用G6000PWXL、G5000PWXL等產品。
03
TSKgel色譜柱分離細胞外囊泡的實例
下圖是使用G6000PW色譜柱分離EVs的色譜圖。該EVs的大小是123nm。
下圖是使用G4000SWXL色譜柱分離EVs的色譜圖。其中餾分P1被識別為外泌體,大小為55~65nm。
最后,小編還將TSKgel色譜柱分析細胞外囊泡的相關文獻,以及與EVs有關的總論和指南都整理了出來,我們提供了原文鏈接供大家查閱,
參考文獻:
1. Z. Varga et al., Towards traceable size determination of excellular vesicles, J. Extra cell. Vesicles, 3 ( 2014) 23298, CCBY,?https://doi.org/10.3402/jev.v3.23298
2. S.S.Tan et al., Therapeutic MSC exosomes are derived from lipid raft microdomains in the plasma membrane, J. Extracellular Vescicles, 2 (2013) 22614, CC BY,?https://doi.org/10.3402/jev.v2i0.22614
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