TSKgel親水性聚合物基質蛋白分離用色譜柱的清洗方法
高效液相色譜柱是消耗品,隨著使用時間或進樣次數的增加,出現柱效下降或伴有峰型拖尾、分叉等情況。需要定期進行清洗和再生,以保證色譜柱的柱效和使用壽命。
不同類型的色譜柱都有與之對應的清洗方法。本篇推送為大家帶來TSKgel親水性聚合物基質蛋白分離用色譜柱的清洗方法及注意事項。
TSKgel親水性聚合物基質的蛋白分離用色譜柱,包括SuperQ-5PW, DEAE-5PW, SP-5PW, CM-5PW, DEAE-NPR, SP-NPR, BioAssist Q/S這幾個型號的離子交換色譜柱,還有疏水、親和等其他多種類型的柱子。
吸附的主要原因
此類型的色譜柱,其充填介質化學穩定性好,不易發生由于官能團脫落而導致樣品組分洗脫位置變化的現象。盡管如此,在柱子長時間使用后,樣品組分的洗脫情況還是會發生改變的。其原因與樣品中極微量的吸附物在柱中的蓄積有關。特別是生物樣品組分復雜,這種吸附現象(非特異性吸附)時有發生。
清洗方法
①.先使用0.1~0.2 mol/L氫氧化鈉水溶液或20~40%的醋酸水溶液進樣清洗(100 μL, 3~5針)即可沖掉色譜柱上吸附的雜質。如果采用該方法清洗后,色譜柱性能仍無法恢復,再考慮以下兩種方法。
②.去除疏水性雜質:在清洗液中添加10-20 %的甲醇、乙腈等有機溶劑后過柱清洗。
③.去除難溶性蛋白:在清洗液中添加6-8 mol/L的尿素或0.2-0.3 %的中性表面活性劑(Triton、Tween、Brij等)后過柱清洗。但需注意尿素及界面活性劑可能在柱中殘留。
其他類型色譜柱的清洗及日常維護相關的內容會在今后的推送中陸續帶給大家,敬請期待!如您有色譜柱使用方面的任何問題,請聯系東曹技術中心:021-34610856 (227分機)
TSKgel SW系列尺寸排阻色譜柱的清洗方法使用UHPLC-SEC色譜柱優化尿激酶分析方法凝膠色譜法測定β-內酰胺類抗生素高分子聚合物東曹色譜產品在病毒載體分析與分離純化中的應用兩步層析法平臺,降低單克隆抗體下游純化工藝成本