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別讓加合峰影響了您的質(zhì)譜解析!

沃特世
2019.8.08

你 知 道 嗎?

鈉、鉀加合物歷來都是蛋白質(zhì)和肽類電噴霧電離(ESI)質(zhì)譜分析面臨的一大難題。雖然痕量金屬污染物通常不會影響蛋白質(zhì)或肽的分離,但它們可能會讓質(zhì)子化離子的相對豐度失真,令光譜變得復(fù)雜,進(jìn)而影響質(zhì)譜解析。

眾所周知,鈉和鉀加合物很難去除,因為它們可能來源于樣品前處理和儀器操作過程中的多種污染源,會對復(fù)雜體系質(zhì)譜圖(例如蛋白藥物肽譜圖)造成挑戰(zhàn)!

以上圖為例,讓我們來分析mAb胰蛋白酶酶解標(biāo)準(zhǔn)品的輕鏈T13肽(序列VQWK)的提取離子流。可以看到,即便使用LCMS分析用水,仍然可能得到差異相當(dāng)大的10.62%鈉加合峰面積,也會造成未加合峰的峰面積減少25%。

如果遇到復(fù)雜的樣品,所關(guān)注的目標(biāo)分析峰本身靈敏度較低,加合物更容易導(dǎo)致目標(biāo)峰不慎遺漏丟失。

怎么辦?

??微量級別的鈉、鉀來源多樣,在樣品制備階段和儀器操作階段都有可能引入,需要做好相應(yīng)預(yù)防。

??對于挑戰(zhàn)性的LCMS分析任務(wù),確保使用最高純度級別的流動相與試劑尤為重要。

??溶劑瓶可以考慮采用非玻璃材質(zhì),以最小化金屬離子的溶出干擾。

??沃特世推薦經(jīng)認(rèn)證的低密度聚乙烯(LDPE)材質(zhì)溶劑瓶,經(jīng)過嚴(yán)格QC測試確保鈉鉀級別在100ppb以下。

同樣我們以上文所述實驗為例,針對同一標(biāo)準(zhǔn)品,但我們使用實驗用純化水,配制含0.1%?IonHance 二氟乙酸試劑(p/n:186009201)的流動相,存放在經(jīng)過認(rèn)證的LDPE溶劑瓶(p/n:186009110)中,從而得到的質(zhì)譜提取圖(如上圖)。可以看到,我們得到了更為真實的峰豐度,這極大地有利于質(zhì)譜解讀數(shù)據(jù),讓您的質(zhì)譜分析更為輕松。

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