使用紫外-可見分光光度法測定維生素B1片的含量
一、實驗資料
1、檢驗藥品
(1)檢驗藥品的名稱? ? 維生素B1片。
(2)檢驗藥品的來源? ??市場購買或送檢樣品。
(3)檢驗藥品的規格、批號、包裝及數量? ??根據藥品包裝確定,并記錄有關情況。
2、質量標準
(1)檢驗依據? ? 《中國藥典》(2010版)二部896頁“維生素B1片”。
(2)含量測定? ? 取本品20片,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于維生素B125mg),置100mL量瓶中,加鹽酸溶液(9→1000)約70mL,振搖15min使維生素B1溶解,加鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度,搖勻,用干燥濾紙濾過,精密量取續濾液5mL,置另一100mL量瓶中,再加鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度,搖勻,照紫外-可見分光光度法[《中國藥典》(2010版)附錄Ⅳ A],在246nm的波長處測定吸光度,按C12H17ClN4OS ? HCl的吸收系數(
)為421計算,即得。
本品含維生素B1(C12H17ClN4OS???HCl)應為標示量的90.0%～110.0%。
3、檢驗原理
紫外吸收:維生素B1分子中有共軛雙鍵,在紫外光區具有特征吸收峰,測定其最大吸收波長處的吸光度即可計算其含量。
定量基礎:紫外-可見吸收光譜為物質對紫外-可見光區輻射的能量吸收光譜,符合光的吸收定律(朗伯-比爾定律),即在一定實驗條件下,供試品溶液的吸光度與其濃度和液層的厚度成正比。它是紫外-可見分光光度法的定量依據。吸收定律可表示如下:
?A=Elc
式中? ? A——吸光度
? ? ? ? ? ?l——液層厚度
? ? ? ? ? ?c——溶液濃度
? ? ? ? ? ?E——吸收系數,即單位濃度、單位液層厚度時的吸光度
? ? ? 吸收系數有兩種表示方式。
? ??(1)摩爾吸收系數(ε)? ? 指在一定波長下溶液濃度為1mol/L,液層厚度為1cm時的吸光度。
? ??(2)百分吸收系數(
)? ??指在一定波長下,溶液濃度為1%(g/100mL),液層厚度為1cm時的吸光度。
二、實驗過程
1、儀器、試藥的準備及試液的配制
1)儀器的準備
紫外-可見分光光度計(配對石英比色皿)研缽、電子或分析天平(感量為0.1mg)、超聲波儀、離心機、濾紙、量筒、容量瓶(100mL,2個)、漏斗、玻璃棒、移液管(5mL)。
2)試藥試液的準備
維生素B1片,鹽酸溶液(9→1000)。
2、操作步驟
(1)檢查儀器和比色皿是否齊全,是否有破損,開機預熱20min。
(2)檢查儀器波長的正確性和1cm石英吸收池的成套性。
(3)取本品20片,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于維生素B125mg),置100mL量瓶中,加鹽酸溶液(9-1000)約70mL,振搖15min使維生素B1溶解,加鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度。
(4)用干燥濾紙濾過,精密量取續濾液5mL,置另一100mL量瓶中,再加鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度,搖勻。
(5)用1cm石英吸收池,以鹽酸溶液(9→1000)作為參比溶液,在246nm的波長處測定供試品溶液吸光度。
3、結果計算
1)計算
按C12H17ClN4OS???HCl的吸收系數(
)為421計算,即得
式中? ? A——供試品溶液的吸光度
?
?——供試品溶液的百分吸收系數
? ? ? ? ? ? l——吸收池的厚度
? ? ? ? ? ??D——供試品的稀釋倍數
? ? ? ? ? ??V——供試品溶液的體積
? ? ? ? ? ??W——供試品的取樣量
2)結果判定
(1)結果判定依據? ? 本品含維生素B1(12C12H17ClN4OS???HCl應為標示量的90.0%～110.0%。
(2)判定原則? ? 如果含量計算結果在規定的范圍內,則該項檢查判為“符合規定”。
3)檢驗原始記錄
4)檢驗報告書
