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何謂正相色譜和反相色譜?在應用上有什么特點

2022.11.28

1、正相色譜基本上可以被看做是液固吸附色譜,其柱填料是吸附劑,其表面上分布有活性吸附位點,溶劑和溶質分子均能被吸附于活性位點上。由于相互作用力有大有小,溶劑分子與溶質分子、溶質分子相互之間又存在競爭吸附,從而造成了在柱內保留時間的差異,使不同物質得到分離。

應用特點:正相色譜一般用來分離中性化合物和離子(或可電離的)化合物,而且以中性樣品為主。適于分離樣品如下:

①對于反相色譜法很難分離的異構體,可以采用以硅膠為固定相的正相色譜分離分析;

②根據被分離樣品極性差別進行族類分離;

③易于水解樣品的分離分析;

④分離分析高脂溶性樣品,其在極性有機溶劑中溶解度很小;

⑤正相色譜也可以用于異構體分離(包括幾何異構體和光學異構體)。

2、流動相極性大于固定相極性的情況,稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。在現代液相色譜中應用最廣泛,現代液相色譜分析工作的70%以上是在非極性鍵合固定相上進行的。反相介質性能穩定。分離效率高,可分離蛋白質、肽、氨基酸、核酸等含有非極性基團的各種物質。

應用特點:反相介質性能穩定。分離效率高,可分離蛋白質、肽、氨基酸、核酸、甾類、脂類、脂肪酸、糖類、植物堿等含有非極性基團的各種物質。


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