血球計數板如何使用
(1)構造:血球計數板是一塊特制的載玻片,它的上表面有4條下凹的槽,構成3個平臺,中間的平臺又被一短橫槽隔為兩半,每半邊各有一個方格網,每個方格網上有9個大小相等的大方格,其中只有中間的一個大方格為計數室,供微生物計數用,這一大方格的長和寬各為1mm,深度為0.1mm,其體積為0.1mm3。
(2)規格:
一種是大方格內分為25中方格,每一中格又分為16小方格;另一種是大方格內分為16中方格,每一中方格又分為25小方格。但是不管計數室是哪一種構造,它們都有一個共同的特點,即每一大方格都是由16×25=25×16=400個小方格組成,見圖:
(3)使用方法
①取清潔干燥的血球計數板,加蓋玻片蓋住網格和兩邊的槽。
②將待測菌液充分搖勻后,用無菌吸管吸少許,由蓋玻片邊緣或槽內加入計數板,使其自行滲入計數室內,計數室內不能有氣泡。靜置5-10分鐘。
③在低倍鏡下找到小方格網后更換高倍鏡觀察計數,上下調動細螺旋,以便看到小室內不同深度的菌體。位于分格線上的菌體,只數兩條邊上的,其余兩邊不計數。即數上線就不數下線,數左邊線就不數右邊線。
④計數時,若使用刻度為25中方格×16小方格的計數板,計數四個角的4個中方格,及中央1個中方格的菌數(即80小方格);若使用刻度為16中方格×25小方格的計數板,就數四個角的4個中方格(即100小方格)內的菌數。每小方格中菌數以5-10個為宜,如菌液過濃可適當稀釋。
⑤每個樣品重復計數2-3次,取其平均值,按下式計算樣品中的菌數。
刻度為25中方格×16小方格的計數板:
刻度為16中方格×25小方格的計數板:
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⑥試驗結束后要清洗和整理試驗用具,特別注意血球計數板不能用試管刷蘸洗滌劑擦洗,正確的做法是浸泡和沖洗,洗后自行晾干或用吹風機吹干。通過鏡檢觀察每小格內是否殘留菌體或其他沉淀物,若不干凈,則必須重復清洗直到干凈為止。