血球計(jì)數(shù)板的使用說明
以計(jì)數(shù)酵母菌為例
(1)用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個數(shù)。
(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計(jì)數(shù),以每小方格內(nèi)含有4-5個酵母細(xì)胞為宜,一般稀釋10倍即可。
(3)將血球計(jì)數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計(jì)數(shù)室上加蓋專用的厚玻片。
(4)將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計(jì)數(shù)室內(nèi)。
(5)計(jì)數(shù)時(shí),如果使用16格×25格規(guī)格的計(jì)數(shù)室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數(shù).如果規(guī)格為25格×16格的計(jì)數(shù)板,除了取其4個對角方位外,還需再數(shù)中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數(shù)。
(6)當(dāng)遇到位于大格線上的酵母菌，一般只計(jì)數(shù)大方格的上方和右方線上的酵母細(xì)胞(或只計(jì)數(shù)下方和左方線上的酵母細(xì)胞)。
(7)對每個樣品計(jì)數(shù)三次,取其平均值,按下列公式計(jì)算每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù)。
3.計(jì)算公式
(1)16格×25格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式：
酵母細(xì)胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個數(shù)/100×400×10四次方×稀釋倍數(shù)
(2)25格x16格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式：
酵母細(xì)胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個數(shù)/80×400×10四次方×稀釋倍數(shù)
4.血球計(jì)數(shù)板的清潔
血球汁數(shù)板使用后，用自來水沖洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干，或用95%的乙醇,無水乙醇,丙酮等有機(jī)溶劑脫水使其干燥。通過鏡檢觀察每小格內(nèi)是否殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復(fù)清洗直到干凈為止。
