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數字PCR的原理

2021.9.18

數字 PCR 的工作原理在于將 DNA 或 cDNA 樣品分割為許多單獨、平行的 PCR 反應,部分這些反應包含了靶標分子(陽性),而其他不包含(陰性)。 單個分子可以被擴增一百萬倍或更多。 在擴增期間,TaqMan? 化學試劑及染料標記探針可用于檢測特定序列的靶標。 當不存在任何靶標序列時,沒有信號累積。 PCR 分析后,陰性反應片段用于生成樣品中靶標分子的絕對計數,而無需標準品或內標。

  • 數字PCR即Digital PCR(dPCR),它是是一種核酸分子絕對定量技術。相較于qPCR,數字PCR可讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的絕對定量。

  • PCR實際上是一個在模板DNA、引物(模板片段兩端的已知序列)和四種脫氧核苷酸等存在的情況下,DNA聚合酶依賴的酶促合成反應,擴增的特異性取決于引物與模板DNA的特異結合。

  • 病原體檢測

精確地對靶 DNA 或 RNA 分子中的細微變化進行定量分析,從而檢測和監測病原體。

  • 與新一代測序 無縫對接

無需使用標準曲線,直接對 NGS 庫執行絕對定量分析。

  • 基因表達分析

可對少量 mRNA 和 miRNA 的細微變化進行準確及重復性極佳的檢測。

  • 環境監測

使用 QX200 系統可測試多種環境樣品,例如土壤和水。

  • 食品檢測

采用經過驗證的 ddPCR 方法對轉基因生物體 (GMO) 進行評估。


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