Nature Nanotechnology:熒光共振能量轉移FRET | 前沿用戶報道
本文轉載自公眾號:今日新材料
熒光共振能量轉移Fluorescence resonance energy transfer (FRET)報告子,通常用于核酸擴增測試的最后階段,以指示核酸靶標的存在,其中熒光通過切割FRET報告子的核酸酶恢復。然而,在制造過程中,需要雙重標記和純化,從而導致了高成本的熒光共振能量轉移FRET報告子。
近日,美國 得克薩斯大學奧斯汀分校(The University of Texas at Austin)Soonwoo Hong,Hsin-Chih Yeh等,在Nature Nanotechnology 上發文,報道了一種低成本的銀納米團簇報告子,并不依賴于FRET作為開/關切換機制,而是依賴于在核酸酶消化時,導致熒光顏色變化的團簇轉化過程。
?在報告子切割時,還觀察到90nm紅移,這是通過簡單供體猝滅劑 FRET 報告子無法實現的結果。電噴霧電離-質譜分析表明,銀納米團簇從 Ag13 到 Ag10 化學計量變化是主要原因,決定了報告子消化后觀察到的發射顏色變化。
研究表明,DNA 模板化的銀納米簇探針,可為檢測核酸酶活性的多功能報告子,并為核酸酶和金屬 DNA 納米材料之間的相互作用,提供了重要見解。
圖1: Subak 報告子及其分段誘導顏色轉換性質的示意圖。
圖2: 基于 Subak-1,DNA 酶 I 的定量化。
圖3: 在 DNA 酶I消化前后,凝膠純化 Subak-1報告子的解吸電噴霧電離質譜分析 electrospray ionization–mass spectrometry,ESI-MS 結果。
圖4: Subak-1 和 Subak-2 的工作原理
(小注:Subak 在韓語中意思是西瓜 watermelon,第一作者語)
文獻鏈接
Hong, S., Walker, J.N., Luong, A.T.?et al.?A non-FRET DNA reporter that changes fluorescence colour upon nuclease digestion.?Nat. Nanotechnol.?(2024).
https://doi.org/10.1038/s41565-024-01612-6
https://www.nature.com/articles/s41565-024-01612-6
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