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乳鐵蛋白測定新標準出爐!迪馬科技GB 5009.299-2024 最新解決方案發布

迪馬科技
2024.3.22

食品中乳鐵蛋白的測定解決方案

乳鐵蛋白因具有抗菌,抗氧化,抗癌,促進腸道發育,促進鐵吸收,以及調節免疫系統等功能,故在乳制品及相關食品生產中均有不同程度的添加。2024年2月8日,國家衛生健康委、市場監管總局聯合印發2024年第1號公告,發布47項新食品安全國家標準和6項修改單。其中包含《GB 5009.299-2024 食品安全國家標準 食品中乳鐵蛋白的測定》。

迪馬科技參考《GB 5009.299-2024 食品安全國家標準 食品中乳鐵蛋白的測定》,使用磷酸鹽緩沖液提取試樣中的牛乳鐵蛋白,肝素免疫親和柱ProElut? HP IAC富集凈化,反相高效液相色譜柱Bio-Bond? C4 300?色譜柱分離檢測,回收率在85%-100%之間。

DIKMA

01

適用范圍

本方案適用食品中牛乳鐵蛋白的測定。

02

溶液配制

(1) 磷酸鹽緩沖液Ⅰ:稱取 30.08g十二水合磷酸氫二鈉,2.50g二水合磷酸二氫鈉,加入800mL去離子水溶解,再加入20mL乳鐵蛋白提取劑*,用純水定容至1L,混勻。

(2) 磷酸鹽緩沖液Ⅱ:稱取15.04g十二水合磷酸氫二鈉,1.25g二水合磷酸二氫鈉,5.84g氯化鈉,加適量水溶解,定容至1L,混勻。

(3) 洗脫溶液:稱取7.1g十二水合磷酸氫二鈉,58.4g氯化鈉,用適量水溶解,并定容至1L。?

*乳鐵蛋白提取劑隨貨(肝素免疫親和柱ProElut? HP IAC)附贈,可有效增加提取效率和凈化效率。

03提取

稱取5g樣品到50mL離心管中,加入25mL磷酸鹽緩沖液Ⅰ,漩渦振蕩5min,然后在4℃,10000r/min條件下離心15min,去除上層奶脂用大量程移液器取出中間層10mL作為上樣液待凈化。

04凈化

ProElut? HP IAC 6mL 20/pk (Cat.#: 67117)

(1)活化:將10mL注射器連接于親和柱上端,放掉柱管保護液,取5mL磷酸鹽緩沖液Ⅱ活化親和柱;

(2)上樣:取提取樣液10mL過柱凈化(控制流速1-3mL/min),棄去流出液;

(3)淋洗:溶液全部過柱后,加入10mL磷酸鹽緩沖溶液Ⅱ淋洗,甩干柱內水分;

(4)洗脫:加入4mL洗脫溶液進行洗脫并收集,洗脫液混勻過0.22μm水系濾膜,待液相色譜檢測。

05

分析條件

色譜柱:Bio-Bond??5μm C4, 250x4.6mm (Cat.#: 84406)

流速:1.0mL/min ???

進樣量:50μL

柱溫:30℃

檢測器:PDA 280nm

流動相:A:乙腈? ?B:0.1%三氟乙酸水溶液

梯度設置:

06

添加回收結果及譜圖

07小結

(1) 肝素鈉親和柱隨貨附贈了乳鐵蛋白提取劑,有效增加了提取效率和凈化效率。

(2) 液體牛奶樣品在50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg添加濃度水平上的回收率均大于85%,回收驗證合格。

08

相關產品信息

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