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如何獲得良好的流動相，看這6點就夠了！
（圖片來源：baotu）
Hello，小伙伴們大家好
今天小編跟大家分享
流動相的過濾、儲存、脫氣、
更換注意事項
01
流動相的過濾
所有溶劑使用前都必須經0.45μm或0.22μm的濾膜濾過，以除去雜質微粒。色譜純試劑也不例外，除非在標簽上標明“已濾過”，生產時間比較久的乙腈更需要過濾，由于長期放置可能會存在二聚體或三聚體。?用濾膜過濾時，特別要注意分清有機相脂溶性濾膜和水相水溶性濾膜。
02
流動相的儲存
流動相貯存應依據后續實驗選擇適當的儲存容器，液相色譜一般選擇玻璃溶劑瓶，而離子色譜淋洗液一般選擇聚丙烯材質的淋洗液罐。貯存容器一定要蓋嚴，防止溶劑揮發傷害人體，防止引起組成變化，也防止氧氣和二氧化碳溶入流動相。
磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉，應盡量新鮮配制使用，不要貯存。容器應定期清洗，特別是盛水、緩沖液和混合溶液的瓶子，以除去底部的雜質沉淀和可能生長的微生物。
03
流動相的脫氣
HPLC所用流動相必須預先脫氣，否則容易在系統內逸出氣泡，影響泵的工作。氣泡會影響檢測器的靈敏度、基線穩定性，甚至無法檢測。溶解氣體還可能引起溶劑pH的變化，對分離或分析結果帶來誤差。
溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相如烷基胺反應。溶解氧能與某些溶劑如甲醇、四氫呋喃形成有紫外吸收的絡合物。在熒光檢測中，溶解氧在一定條件下還會引起淬滅現象。在電化學檢測中特別是還原電化學法，氧的影響更大。
圖片來源：baotu
04
常見脫氣法
1）離線脫氣法：
如超聲脫氣，用來去除流動相中較大的氣泡。在線脫氣法，用來去除流動相中較小的氣泡。雖然現在很多HPLC色譜儀已經配制在線脫氣機，但超聲脫氣仍不可省。在線脫氣僅能去除比較小的氣泡，對于大氣泡很難去除，導致脫氣機超負荷工作，影響其壽命。
2）真空脫氣（在線脫氣機）
也是比較常用的脫氣方法，流動相通過被抽真空負壓的脫氣包，溶入的氣體形成氣泡溢出，其效果僅次于氦氣脫氣。目前絕大多數液相色譜使用的是在線脫氣機，即真空脫氣。
3）其他脫氣方法：
氦氣脫氣：可除去80%～90%的溶入氣體，且可有效去除水溶液中溶解的頑固氣體，在電化學檢測時常用，因其價格昂貴在其他實驗中未見普及。
加熱回流脫氣：僅適用于不含有機溶劑的流動相。
05
溶劑濾頭
流動相過濾頭可以防止溶液中的微小顆粒進入HPLC系統。有些濾頭頂端階梯式連接出口可分別用于1.5mm，2.2mm，3.5mm內徑的管路連接。濾頭應定期清洗，尤其是水相使用的濾頭，要定期及時清洗。
06
流動相更換注意事項
先將流動相濾頭拿出溶劑液面，抖去濾頭上殘留的大部分溶劑后再放入下一個流動相，避免殘留的溶劑將下一個流動相改性。
作者：龐慶齡
排版：趙林
審核：鄒天駿 趙桂芝
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