聚合酶3'5'外切酶活性──校對作用的介紹
這種酶活性的主要功能是從3'→5'方向識別和切除不配對的DNA生長鏈末端的核苷酸。當反應體系中沒有反應底物dNTP時,由于沒有聚合作用而出現暫時的游離現象,從而被3'→5'外切酶活性所降解。如果提高反應體系的溫度可以促進這種作用,這表明溫度升高使DNA生長鏈3'末端與模板發生分離的機會更多,因而降解作用加強。當向反應體系加入dNTP,而且只加放與模板互補的上述核苷酸才會使這種外切酶活性受到抑制,并繼續進行DNA的合成。由此推論,3'→5'外切酶活性的主要功能是校對作用,當加入的核苷酸與模板不互補而游離時則被3'→5'外切酶切除,以便重新在這個位置上聚合對應的核苷酸。在某些T4噬菌體突變株中DNA復制的真實性降低,而易發生突變,從此突變株分離得到的聚合酶的3'→5'外切酶活性很低。相反,另外一些具有抗突變能力的T4突變株中的聚合酶的3'→5'外切酶活性比野生型高得多,因此,其DNA復制真實性好,變異率低。可見,3'→5'外切酶活性對DNA復制真實性的維持是十分重要的。
推薦