抗原修復方法介紹（抗原熱修復和酶消化方法）
抗原修復主要用于福爾馬林或多聚甲醛固定的石蠟包埋組織切片。
1、抗原熱修復
（1）高壓熱修復
在沸水中加入EDTA（pH8.0）或0.01M枸櫞酸鈉緩沖溶液（pH6.0）。蓋上不銹鋼高壓鍋的蓋子，但不進行鎖定。將玻片置于金屬染色架上，緩慢加壓，使玻片在緩沖液中浸泡5分鐘，然后將蓋子鎖定，小閥門將會升起來。10分鐘后，去除熱源，置入涼水中，當小閥門沉下去后打開蓋子。本方法適用于較難檢測或核抗原的抗原修復。
（2）煮沸熱修復
電爐或者水浴鍋加熱0.01M枸櫞酸鈉緩沖溶液（pH6.0）至95℃左右，放入組織芯片加熱10~15分鐘。
（3）微波熱修復
在微波爐里加熱0.01M枸櫞酸鈉緩沖溶液（pH6.0）至沸騰后將組織芯片放入，斷電，間隔5~10分鐘，反復
1-2次。適用的抗原有：AR、Bax、Bcl-2、C-fos、X-jun、C-kit、C-myc、E-cadherin、Chromogranin
A、Cyclin、ER、Heat shock
protein、HPV、Ki-67、MDMZ、p53、p34、p16、p15、P-glycoprotein、PKC、PR、PCNA、ras、Rb
和TopoismeraseⅡ等。是以高溫、高壓對常規固定的石蠟切片進行抗原修復或復原的一種非蛋白酶消化以提高抗原抗體陽性檢測的一種方法和技術手段。甲醛和蛋白水解交聯過程中氨基酸側鏈上的某些基團（抗原決定簇）如咪唑、吲哚等基團受到影響，通過120℃高溫或強堿處理后，可使交聯打開。
2、酶消化方法
常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前預熱至37℃，切片也預熱至37℃，消化時間約為
5~30分鐘；胃蛋白酶消化37℃時間為30分鐘。適用于被固定遮避的抗原，其中有：Collagen、Complement、Cytokeratin、
C-erB-2、GFAP、LCA和LN等。
