做代謝組學檢測的血液樣本怎么采集與前處理
采集：
由于生物樣本通常采用組內平行樣本，不可避免的會由于時間、環境等因素產生“個體差異”，所以在采集動物血液時需要使用麻醉劑以減少采血過程中動物的疼痛感、不適感、創傷性，以減小應激反應造成的代謝物的變化、盡量縮短采集時間、保持一致的采集部位等細節問題；另外也考慮到樣本采集或制備的原則和易實現性，操作應具有簡便性和可重現性。
從生物體內采集出的血液首先會收集到專用容器，如動物實驗使用注射器取血后可以直接存儲在EP管內或采血管中，但若是從醫院檢驗科采集的血液會首先存儲在專用的真空采血管內，管內分別含有不同種類的抗凝劑、促凝劑等成分，適用于不同檢測項目，例如血清和血漿的生化試驗、免疫試驗、凝血試驗、紅細胞沉降率試驗、血常規檢測、血糖檢測等。常用的抗凝劑有EDTA、檸檬酸鈉、肝素鈉、肝素鋰，這些成分在與血液混合時不可避免地會產生基質效應，如促進或抑制血液中的細胞代謝、酶代謝，造成血液中小分子的種類和含量變化。有學者在血液與抗凝劑/促凝劑的相互作用方面進行了研究，認為肝素鈉相比于其他抗凝劑，與血液混合后引起的基質效應較弱，產生的雜質較少，并且也滿足重現性要求，在代謝組學研究中若使用氣質聯用或高分辨的液質聯用作為主要分析技術，建議選擇含有肝素鈉作為抗凝劑的采血管儲存離體血液。
前處理：
血液中含有血細胞，在采血后血細胞仍有短時間的存活，所以在采集血液樣本后需要盡快分離血細胞，例如高速離心可以將微小雜質及血細胞沉淀，減少離體血細胞的代謝造成的影響。若不需要第一時間進行分析，則應該盡快分裝，并儲存在-80℃生物低溫冰箱中。從微觀角度來說，借鑒化學反應速率常數隨溫度變化關系公式（阿倫尼烏斯公式），生物樣本的代謝活動與樣本所處溫度成正相關，在-80℃或液氮（-196℃）這種極低溫度下，血液中的酶或其他活性物質的活動才會減弱或停止，同時樣本中的水以晶體形式存在，減小了流動性，分子的傳輸性極大減弱，避免樣本變質或分解代謝，可保存數月數年。
血液樣本的前處理相比于尿液等其他類型的體液樣本，過程更多也更細致一些。原因是血液中含有的成分十分復雜，不同種類的化合物極性千差萬別，且存在種類較多、豐度較高的蛋白質成分，通常采用一定比例的有機溶劑進行渦旋震蕩萃取（有機溶劑沉淀法），使極性和非極性小分子物質充分溶解在溶劑中，經高速離心后得到的上清液和下相為小分子萃取液，沉淀物質為蛋白及雜質成分。廣泛使用的溶劑包括甲醇、水、乙腈，其他如丙酮、異丙醇等等低極性和高極性的溶劑需要根據具體實驗需求而單獨定制設計。
總體而言，血液樣本的采集與前處理看似簡單，但過程中包含大量細節考慮與操作，應盡可能標準化，但一種方法不可能適用于所有實驗，需要圍繞實驗目的進行充分的個性化實驗設計，樣本的采集和前處理遵循易實現性、易重現性、多組分保留等原則，在生物樣本的來源、采集、前處理等源頭把關，保障實驗最終數據與結果的可靠性，經得起驗證。
-
精英視角
