GFP綠色熒光蛋白的檢測方法有哪些
檢測方法：
1、實驗準備
? Modulus單管型多功能檢測儀
? Blue熒光模塊(P/N 9200-040)
? 微量適配器(P/N 9200-928)
? 純化的rAcGFP1蛋白（Clontech，NO.632502）
? 200ul加樣器與20ul加樣器
? TE Buffer (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0)
? 1.5ml離心管
2、.儀器準備
2.1 關閉Modulus的電源，為Modulus插入BLUE熒光檢測模塊.
2.2 打開Modulus的電源，儀器預熱1min
2.3 按照說明插入微量適配器
3.、制備標準曲線
3.1 對rAcGFP1進行系列稀釋
3.2 在微量比色杯中加入100ul的rAcGFP1稀釋后溶液。注意：避免在微量比色杯中出現氣泡，負責會引起檢測誤差。.
3.3 將微量比色杯插入到微量適配器中，點"Measure Fluorescence Raw."檢測
3.4 記錄檢測結果，對其他樣品重復4.2-4.3的步驟
3.5 利用熒光值（FSU）與樣品濃度做出標準曲線
4、 校準
4.1 使用Modulus檢測未知樣品前，你可以使用rAcGFP1稀釋液來校準Modulus儀器
4.2 使用表1中的5個稀釋液來校準Modulus。選擇"ng/μL"作為測量單位，使用0 ng/μL 作為空白標準；為了盡可能準確，使用接近實際樣品的稀釋液做其他幾個點的校準。
4.3 保存校準，可供以后調用 (可選).
4.4 使用"Measure Fluorescence."開始檢測未知樣品。注意：在校準后就無需再做標準曲線。
4.5 樣品濃度將直接在屏幕上顯示.
簡介：
綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein，GFP)是一類存在于腔腸動物體內的生物發光蛋白。1962年Shimomura等首先從多管水母(Aequoria victoria)中分離出一種分子量為20kD的稱為Aequorin的蛋白。由于水母整體熒光及提取的蛋白質顆粒熒光都呈綠色，因此，人們將這種蛋白命名為綠色熒光蛋白。
GFP具有多種優點：易于檢測，靈敏度高；熒光性質穩定，耐受性強；易于表達，無細胞毒性；可用于活細胞檢測。因此，GFP可作為報告基因用于檢測基因表達或調控，或作為融合標簽來檢測蛋白質分子的定位、遷移、構象變化以及分子間的相互作用，或者靶向標記某些細胞器
