熒光光譜 怎么確定激發波長
(1) 如果你的儀器有三維掃描功能,那就非常簡單了,按照說明書要求去做就可以了。
(2) 如果儀器沒有上述功能,一般可將儀器的激發波長(EX)先設定為200nm,然后進行發射波長(EM)模式掃描,(EM)波長范圍暫設定為 210-800nm,然后記錄所有出現的峰值波長;改變激發波長(EX)后再掃描,如第二次發射圖譜中的某個(或某些)峰的位置沒有位移(或位移很少),一般來說這個(或這些)峰就是熒光峰;因為熒光峰的位置是不隨激發波長的改變而改變的,僅是峰高(或峰面積)發生改變
(3) 將確定的熒光峰的波長作為發射波長(EM)固定下來,再做激發波長(EX)的掃描,激發波長的范圍要小于發射波長(根據斯拖克斯定律);如果僅出一個峰則很簡單確立下來,再將這個波長固定下來重新做真正的發射波長(EM)掃描,可以得到良好的信噪比的結果值;如果做激發波長(EX)掃描后出現幾個峰,則需要有經驗的選擇了,一般選擇峰形高度適合并又有一定帶寬的峰為激發波長。
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