美國新冠病毒復制特性
3月3日,美國疾控中心等機構的研究人員在bioRxiv上發表論文,描述了從第一個美國新冠肺炎患者體內分離出的病毒,并描述了其基因組序列和復制特性。(bioRxiv論文未經同行評議。)
研究人員表示,此次疫情傳播速度之快前所未有,迫切需要為進一步研究新冠病毒提供參考試劑。公共衛生界也需要病毒裂解物作為診斷參考,而研究界需要病毒分離物測試抗病毒化合物、開發新疫苗和進行基礎研究。
美國第一例患者于1月20日被華盛頓州和美國疾控中心確診。研究人員從該患者鼻咽(NP)和口咽(OP)標本中分離出病毒,并對病毒序列、復制特性和細胞培養向性進行了表征。
研究人員于1月22日將陽性標本重新制作和冷凍,然后接種到細胞培養皿中。2天后,研究人員觀察到細胞病變效應(CPE),并在3天后收集到病毒裂解液。他們還觀察了冠狀病毒的形態和形態發生特征。
此外,研究人員測序了從第一代OP和NP標本中分離出的病毒,結果顯示完全匹配。并且,研究人員在沒有胰蛋白酶的情況下傳代了這種病毒。而且,新冠病毒在Vero CCL81細胞和Vero E6細胞中復制到高滴度。
研究人員在VeroE6細胞(另一種恒河猴胎兒腎臟細胞系)上產生了第四代新冠病毒。RNA測序顯示,其與原始序列相比無核苷酸突變。SARS-CoV和MERS-CoV也分別在VeroE6和Vero CCL81細胞上生長良好。經過一系列的稀釋感染后,研究人員還發現新冠病毒在兩種Vero細胞中都有復制,然而,VeroE6細胞的病毒滴度略高于Vero CCL81。
研究人員已將病毒分離物存入兩個病毒試劑庫,BEI資源和世界新興病毒和蟲媒病毒參考中心,以便公眾衛生和研究界能夠廣泛獲得該病毒及相關信息。