薄層色譜實驗原理簡介
薄層色譜，常用TLC表示，是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術。常用的有薄層吸附色譜和薄層分配色譜兩種。薄層吸附色譜是將吸附劑均勻地涂在玻璃板上作為固定相，經干燥活化后點上樣品，以具有適當極性的有機溶劑作為流動相。當流動相沿薄層展開時，混合樣品中易被固定相吸附的組分(即極性較強的成分)移動較慢，而較難被固定相吸附的組分(即極性較弱的成分)移動較快。經過一段時間的展開后，不同組分彼此分開，形成互相分離的斑點，如圖2-13所示。它不僅適用于少量樣品(1~100 ug甚至0.01 ug)的分離，還適用于較大量樣品(可達500 ug)的精制。此法對于揮發性較小或在較高溫度時易發生變化而不能用氣相色譜法分析的物質特別適用。薄層色譜是在干凈的玻璃板、塑料或者鋁基片上均勻涂一層合適的吸附劑。待干燥、活化后，將樣品溶液用內徑為0.5mm、管口平整的普通毛細管點在離薄層板一端約1cm處的起點線上晾干或吹干后，將薄層板放入盛有展開劑的展開槽內，進入深度約0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm處時，將薄層板取出，吹干后噴顯色劑顯色或者在紫外光燈下顯色。計算原點至色斑中心的距離與原點到展開劑前沿的距離的比值，即 Rf值，如圖2-14所示。良好的分離，Rf值應在0.2~0.8之間，否則，應更換展開劑重新展開。
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