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金標免疫層析法和熒光免疫層析法的區別

2022.7.19

酶免法是酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA),它的中心就是讓抗體與酶復合物結合,然后通過顯色來檢測。用酶與指示劑的反應來放大信號便于檢測。
就是用酶標記抗原或抗體,抗原抗體反應后加入酶的指示劑(酶的底物反應后會顯色),顏色的深淺與抗原或抗體的量成正比。

金標法也是標記免疫的方法之一,用來作標記物的是膠體金(氯金酸在還原劑的作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,形成帶負電的疏水膠溶液,由于靜電作用而成為穩定的膠體狀態,故稱為膠體金。)分為層析法和斑點滲透法。
以層析法為例:層析法一般采用雙抗原夾心法免疫測定原理,選擇經純化的基因工程制備的抗原,分別作為包被抗原和膠體金結合抗原。當待檢標本中含有HIV抗體時,先和金標記抗原結合,由于層析作用反應復合物沿硝酸纖維膜向前移動,當遇到包被抗原時,形成Ag-Ab-Ag-Au復合物富集在包被線上,形成紅色沉淀線。在包被膜上還有一條質控線對照,故當有兩條紅線時判為陽性,只有一條紅線時,判為陰性。

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